化学化工学院 \AK|~:\]
博士研究生科学研究计划书 UU
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考生姓名: |XH3$;=*h
报考专业: q3P3euK3
报考导师: bL[PNUG
职 称: X)&Z{ V>
2012年11月20日 .$OInh
-1-一、选题背景及意义 0'~b<>G%
药物缓释指用药后能在较长时间内持续释放药物以达到药效;控释指药物能 F'~/
在预定的时间内以预定速度释放,使血药浓度长时间维持在有效范围。药物的缓 /pge 7P
/控释有以下优点:(1)对半衰期短或需要频繁给药的药物,可减少服药次数,使 n[WeN NU
用方便。特别适用于需要长期服药的慢性疾病患者,如心血管疾病、心绞痛、高 +|8Lt[^ux
血压、哮喘等;(2)使血药浓度平稳,减缓“峰谷”现象,降低药物不良反应发 bT*4Qd4W
生的频率和严重程度,提高临床用药的安全;(3)缓慢释放增强药物的有效性, 88*RlxU
药物在口服或注射后释放出有效成分的速度缓慢,吸收速度也较恒定,药物作用 7lj-Z~1
维持的时间较长;(4)增强药物的化学稳定性,某些药物口服后易被体内环境所 RtW5U8
破坏,制成缓控释制剂后可按要求定时、定位释放,提高稳定性。 Yptsq@s
脂肪族聚碳酸酯是一类重要的可降解生物医用材料,具有优异的生物相容性 =!
c+|X`
和生物可降解性 i|
O7nB@
[1] 7w$R-Y/E
,目前已经广泛应用于载药体系、组织工程和特殊医用器材领 [;2:
lbPx
域。传统脂肪族聚碳酸酯通常存在亲水性差、缺少进一步化学反应所需官能团、 bYgYP|@
与生物体细胞和器官相容性较差等缺点。解决这些问题的一个主要途径是在聚碳 &e)p6Egl
酸酯中引入官能团或者活性生物分子,来调节聚合物的理化和生理性质,包括亲 y,>m#6hx#
水/疏水性、细胞膜渗透率、生物粘附能力、生物相容性和降解性等。功能环状 2r0!h98
碳酸酯单体的合成简便易行,通过二羟基/多羟基化合物和三光气或者氯甲酸乙 Jqj6L993e
酯反应即可实现,产物多为六元环和七元环 3d<HIG^W}
[2-4] 4a |Fx
。根据二羟基/多羟基化合物的不 yfW^wyDd2o
同来源,主要将功能聚碳酸酯分为三大类:(1) 基于丙三醇的环状碳酸酯和共聚
MB 5[Js|
物;(2) 基于二羟甲基丙酸的环状碳酸酯和共聚物;(3) 基于季戊四醇的环状碳 vTEkh0Ys
酸酯和共聚物。除此之外,还有基于L-酒石酸、多糖、1,3-二羟基丙酮和氨基酸 t5APD?5 c
等合成的功能聚碳酸酯 XOwMT,=Z)
[5] \@3
。 ~
7Nyi dV;
两亲性高分子在水溶液中可通过自组装形成球状、圆柱状和囊泡三种形态, 9GwsQ \
疏水部分可促进水溶性较差类药物的溶解,同时“核壳”结构在人体内能对负载 HXHPz4
的药物起到一定的保护作用。通过设计高分子的结构还可以实现药物的平稳释 7qz-RF#s8
放、靶向释放、刺激响应释放等功能,因此开展药物的控/缓释载药体系研究具 }_22wjm~
有重要意义。 &FVlTo1
-2-二、研究现状 E|;5Z*
多数抗癌药物水溶性差,目前普遍采用DMSO,CremophoreEL,Tween80 z=_{jjs
等表面活性剂来溶解药物,但是这些溶剂会损害人体的肝肾并可能引起严重过敏 ;T+U&U0d|
反应 JJ0
CM:xe
[6] Nt-SC
LDM
。此外,依靠表面活性剂来溶解抗癌药物通常稳定性较差,全身给药后会 f4T0Y["QA
发生药物沉降而导致无法发挥药效,因此需要发展新型抗癌药物负载。 BQ:Kx _
研究发现,在高分子“核壳”载药体系中引入与药物结构相似,具有相容性 JwtI(>cI
的“核”结构,会提高载药量并延长药物在载药体系中的保留时间 aQ:f"0fL
[7-9] 'm5(MC,
,葫芦素 *m@
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(Cucurbitacin)是一类高度氧化的四环三萜类化合物,具有抗肿瘤、抗化学致癌、 97wy;'J[u
消炎等多种生物活性,与胆甾醇化学结构类似。基于此,Mahmud HHTsHb{7
[10] XW Q0V
等合成了含 c
loSJmUlQ
有胆甾醇侧基(位于PCL链段中)的共聚物MePEO-b-PChCL、含有苄氧羰基侧基 0P40K
的共聚物MePEO-b-PBCL以及不含侧基的MePEO-b-PCL,对比研究了三种载药 QU!'W&F6
体系的CuI载药量和控释行为,见图1.4。结果发现MePEO-b-PChCL对CuI的 PZ(<eJ>
溶解性最好并且载药量最多,但只能对药物初期释放进行控制(~1h),1h后药 \u-e\w
物控释行为和MePEO-b-PCL几乎相同,没有呈现出预期最好的控释行为。相比 M .`
之下MePEO-b-PBCL的药物控制效果最好,研究者认为是由于胆甾醇侧基体积 ?EQ^n3U$
较大并且排列较密,使得空间位阻增大,限制了胶束“核”中胆甾醇侧基与药物 tZ
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的相互作用,导致“核”粘度较低从而无法控制药物的释放行为。 6Su@a%=j
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图1.1两嵌段共聚物MePEO-b-PChCL的合成 jJUGZVM6)
Fig.1.1SchemeforthepreparationofMePEO-b-PChCLblockcopolymer. skI(]BDf
为提高在血液中两亲性聚合物载药胶束的稳定性和载药量,可将壳、核壳界 v_z..-7Dq+
面或者核进行化学交联 Qsg/
V]
[11,12] PEW4J{(W
。但由于交联过程复杂,以及对聚合物载体结构性能 BIV<ti$.
-3-和后续药物控制释放的影响不确定性,此法的应用受到限制。Li e"fN~`NhY
[13] ^qeY9O
等用含端羟基 '%SR. JL
的PEG为大分子引发剂,DBU为催化剂通过开环聚合制备了嵌段共聚物 6 u-$
PEG-b-PBC;在室温下通过Pd/C催化将PBC中苄氧羰基还原为羧基,得到了侧 Zk=*7?!!
链含有羧基活性官能团的聚合物PEG-b-PCC;再采用EDC/HOBT作为脱水剂和 S9G+#[.|
催化剂将十二烷醇连接在PEG-b-PCC上,得到PEG-b-PCD(接枝效率高达95%), *;hY.EuoFz
见图1.2。PEG-b-PCD结构中,十二烷醇连接到聚碳酸酯主链上,产生了类似核 gB>imr#e&
壳界面交联的结构,提高了疏水核的稳定性;此外药物恩贝宁具有和十二烷醇相 ~)q
g
似的长链脂肪端基,从而可与PEG-b-PCD中的PCD末端基发生作用,提高相容 OXHvT/L`
性。这两因素协同作用大幅度提高了恩贝宁(Embelin)的载药量和载药效率。实验 , 3X: )
结果显示,PEG-b-PCD对恩贝宁的体外释放有明显控制作用(PEG114-PCD29和 b!0DH[XKV
PEG114-PBC30 药物半衰期分别为12h,4h),对前列腺癌细胞的繁殖有明显的抑 KVB0IXZC~
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图1.2聚碳酸酯骨架、PEG亲水壳和十二烷醇疏水核构成两亲性聚合物 Q7Iw[=;\
Fig.1.2Schematicillustrationoflipopolymerwithpolycarbonatebackbone,hydrophilicPEG ,R%q}IH#
coronaandhydrophobiclipidcore. U_x )#,4
目前为止,绝大部分两亲性聚合物形成的载药胶束体系都是采用PEG为亲 >zAUW[]C:I
水性外壳,研究人员通常是改变疏水内核来进行相关研究。PEG作为载药体系 g0R~&AN!g
与人体内部生理环境直接接触部分,能够防止载药体系被人体内部细胞吞噬和摄 MZ+^-@X
取 .*m>\>Gsgw
[14,15] )nL`H^
,这对于药物输送具有重要意义。但是当药物释放后,残留的PEG在人 .<@8gNm3
-4-体内不能通过水解作用降解为小分子,只能通过排泄系统排出。考虑到PEG存 .X# `k
在的这一问题,有必要发展代替PEG的新型可降解亲水性胶束外壳。武汉大学 fhL,aCS=
钟振林课题组 =UUU$hq2
[16] DC{>TC[p1k
以DTC和BTMC为单体,设计合成了含有亲水性链段的三嵌 _S>JKz
段共聚物(PHTMC-b-PDTC-b-PHTMC),嵌段组成均为可降解的聚碳酸酯;并且 '>r7
V
PHTMC嵌段上含有大量羟基官能团,为后续连接各种功能化的生物活性分子提 eek7=Z
供了反应位点,见图1.3。 ggJO:$?$L
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图1.3以PHTMC为亲水外壳的两亲性聚合物载药体系示意图 zy/
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Fig.1.3SchematicillustrationofamphiphiliccopolymerwithPHTMChydrophiliccorona. pjKWtY@=X
阿霉素(Doxorubicin,DOX)是目前临床上广泛使用的非特异性抗肿瘤药物, le|~BG hL
通过抑制RNA、DNA和大分子的生物合成杀灭癌细胞,因此将抗肿瘤药物直 o=1Uh,S3R
接输送到癌细胞的细胞质和细胞核中是提高药效的关键。谷胱甘肽是一种广泛存 #+Ir>GU
在于动物细胞中的三肽(Glu-Cys-Cly),在生物体内的氧化还原反应中起着重要的 md)c0Bg8~
作用,但在细胞质内含量(2~10mM) @vC4[:"pD}
[17,18] A
VlhNIr
远高于在细胞外含量(50~1000倍) D=j-!{zB
[19] S 6@u@C
, cOmw?kA*G
基于此可设计出含二硫键(-S-S-)的生物还原型载体作为药物的输送工具。苏州大 oK6tTK
学钟志远 deBY5|
[20] {Z(h.de
课题组合成了以二硫键(-S-S-)相连接的葡萄聚糖(Mn=6000)亲水壳 UOv+T8f=
-5-与PCL疏水核的两亲性聚合物Dex-SS-PCL,研究了细胞对药物的摄取和在细胞
_C%3h5
内药物的释放行为。结果表明,Dex-SS-PCL在细胞外非还原性环境中能保持较 ^me-[
5
好稳定性,进入细胞内还原性环境后能快速释放药物至细胞质及细胞核中,起到 dyz2.ZY~2
消灭癌细胞的作用,见图1.4。 U6glp@s
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图1.4亲水葡萄聚糖外壳在细胞内谷胱甘肽还原下脱落示意图 T(#J_Y
Fig.1.4Illustrationofdextranshellsareshedoffbyintracellularglutathione. 4zXFuTr($
为了进一步提高载药量和控制药物释放,董常明 >"??!|XG^
[19] ;0Q4<F
等将溶胶凝胶技术和含有 q;B4WL}
二硫键的生物还原型载体相结合,制备了一种新型的核中心交联两亲性载药体系 ?j'7l=94A
TMS-PCL-SS-PEO,见图1.5。结果表明,相比于核中心未交联的胶束,交联胶 oK9( /v
束的载药量和载药效率提高了一倍左右;体外释药实验采用10mMDTT模拟细 S4Pxc
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胞膜内还原环境,交联和未交联的载药胶束均表现出更快的释药行为,并且交联 WltQ63u
胶束能更好地控制初期药物突释。 +G$4pt|=
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-6-图1.510mMDTT中未交联与核交联胶束的药物释放 @efh{
Fig.1.5Reduction-triggereddrug-releaseofuncrosslinkedandcore-crosslinkedDOX-loaded 0*VWzH
micellesin10mMDTT. % BVs47g
为了实现对病变细胞的靶向识别能力,提高药物效率,降低副作用,还可以 md=TjMaY
在载药体系结构中连结上生物活性分子。研究发现,叶酸受体(FRs)是一种糖基磷 zofa-7'Bn
脂酰肌醇(GlycosylPhosphatidylinositol,GPI)锚定的膜蛋白,能与叶酸特异性结合。 "/yC@VC>
叶酸受体在人体许多实体肿瘤细胞膜表面高度表达,而在正常组织中低表达。由 9 *xR6
于叶酸可被癌细胞表面的叶酸受体通过介导内吞摄取,所以通过将叶酸分子连接 Moy <@+
在聚合物输送载体上,有望实现对癌细胞的靶向释药。Hu 9Q.rMs>qj
[21] ks&*O!h
等把DL-丙交酯 F7A=GF'
(DLLA)与含烯丙基的碳酸酯单体MATMC共聚得到含有碳碳双键官能团的聚合 w2;eh]k
物,然后将巯基化的叶酸通过“ClickChemistry”连接到聚合物链上,得到含活
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性生物分子的功能聚碳酸酯,见图1.6。研究了猴肾细胞在聚合物上的粘附与增 H
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殖行为,结果发现细胞在叶酸接枝聚合物表面的粘附与增殖能力都有提高,可作 tankR9(o
为靶向释药载体。 7z/|\D_{
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(iii) Sggq3l$Qc
图1.6含有叶酸分子的P(LA-co-MAC)/FA合成步骤 #eN{!Niy&U
Fig.1.6SchemeforthepreparationofcopolymerP(LA-co-MAC)withbioactivefolicacid fGv#s
X
三、研究内容及创新点 I2a6w<b
1.设计具有新型亲水外壳、功能疏水内核,并且能在细胞内环境刺激下释放药 jY6MjZI
物的载药体系。亲水性外壳采用含羟基的可降解聚碳酸酯,内核含有与输送药物 ms_ VM>l
结构相似的疏水侧基,核壳之间通过二硫键连接,示意图见图1.7。 [DHoGy,P
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